將*培養基吸出保存在4℃環境下,培養瓶內留有5ml供細胞生長。經觀察,SY5Y的密度在80%左右,放至二氧化碳培養箱(37℃,5%二氧化碳)培養。
使用含有EDTA的胰酶消化進行1:3傳代,約30S細胞成塊脫落,這說明消化過度。含有EDTA的胰酶消化能力強,下次傳代應注意縮短消化時間。消化過度,細胞成塊脫落,不易吹散。
傳代后,成團的細胞不利于營養物質的獲取和代謝廢物的排出,嚴重影響增殖,甚至導致凋亡。下午5時觀察,細胞均已鋪開貼壁,密度較大,狀態良好。為保險起見,在最初的培養中,使用的培養是*培養液。使用完畢后,得自己配:1640+15%滅活FBS+1%雙抗+1%谷氨酰胺。將FBS在二氧化碳培養箱放置35分鐘進行滅活。本來FBS凍存的,需在室溫下恢復室溫,方可放置于二氧化碳培養箱中。將泡酸的玻璃培養瓶、滴管、200ml玻璃瓶和尖底玻璃離心管清洗并高壓后風干。
介紹下SH-SY5Y:中文名稱人神經細胞母細胞瘤細胞,該細胞分化低、繁殖快、細胞形態、生理和生化功能與正常神經細胞相似。被廣泛應用于神經系統疾病發病機制研究和藥物作用機制方面的研究
[1]。該細胞可以產生兒茶酚胺和多巴胺,磁刺激的頻率和時間顯著影響兒茶酚胺的代謝!而兒茶酚胺與抑郁癥有關,因此,有人對體外培養的SH-SY5Y施加rTMS,探究rTMS可能存在的對抑郁癥的影響
[2]。該細胞還可以表達淀粉樣前體蛋白(amyloid precursor protern)和β淀粉樣蛋白(β-amyloid )
[3]。這個兩種蛋白與AD的發病機制有關。
如需了解更多技術知識,歡迎聯系上海喆圖科學儀器有限公司。
電話
微信掃一掃